Thursday , 14 December 2017
UPDATE :
You are here: Home >> Publikasi Jurnal Nasional tidak Terakreditasi >> ISOLATION OF ASPARTATE TRANSCABAMYLASE (ATCase) FROM MUTANT BABY HAMSTER KIDNEY CELL LINE CULTURE

ISOLATION OF ASPARTATE TRANSCABAMYLASE (ATCase) FROM MUTANT BABY HAMSTER KIDNEY CELL LINE CULTURE

Sulaiman N Depamede

Enzim ATCase rnemiliki peran sangat penting dalam proses sintesis de novo pirirnidin. Selama ini ATCase dari bakteria yang sudah diteliti secara detil, namun penelitian ATCase mamalia masih parsial. Pada hewan, enzim ATCase merupakan bagian dari polipeptida yang dikenal dengan CAD (carbamoyl-phosphate synthetase aspartate transcarbamylase dihydroorotase). Keberhasilan mengisolasi dan mengkarakterisasi ATCase dari rnamalia sangat penting bagi riset pengembangan obat, industri maupun pemahaman fisiologis hewan ternak secara lebih mendalam. Secara in vitro CAD sudah dapat dihasilkan melalui kultur sel mutan ginjal bayi hamster. Proses pemumian CAD dari kultur sel mutan ini sudah pula dilakukan, namun yang lebih fokus pada ATCase masih terbatas, serta melalui proses enzimatis yang dapat mempengaruhi proses karakterisasiATCase. Dalam penelitian kali ini dilaporkan hasil isolasi ATCase dari kultur sel mutan tersebut. Isolasi dilakukan dua tahap menggunakan kolom Blue® Sepharose dan kolom Superdex 200 Prep Grade dengan sistem ‘fast protein liquid chromatography’ (FPLC), tanpa proses enzimatis. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa metode isolasi dua tahap tersebut dapat menghsilkan isolat ATCase (4,40 mg/ml) dari kultur sel mamalia dan dapat dikarakterisasi. Hasil karakterisasi menunjukkan bahwa kinetika ATCase sel mutan memiliki pola sesuai dengan persamaan Michaelis-Menten, dengan nilai Km 11,6±3,7 mM dan Vmax 24,5±l,8 ?mo/l/menit/mg substrat karbamil fosfat, dan terhadap substart aspartat dengan nilai Km 8,0±2,8mM dan Vmax 17.7±1,8 ?mol/menit/mg. Hasil inimenunjukkan bahwa metode isolasi kolom kromtografi dapat digunakan untuk mengisolasi ATCase dari kultur sel mutan ginjal bayi hamster.

Kata kunci: ATCace, CAD, sel mutan ginjal bayi hamsten, kultur sel. Download File PDF

About Fahrul Irawan

Scroll To Top